技术平台
交联剂固定细胞内蛋白质互作复合物,,,,,通过抗体免疫沉淀(IP)富集指标复合物,,,,,经酶解后质谱鉴定交联肽段
√保留幽微和瞬时的蛋白互作
√可钻研内源性指标蛋白的互作组(依赖抗体质量)
√某些案例中(使用特殊富集标签)可结合变性前提去除非特异布景
项目简介:本案例使用伯胺反映交联剂BS3对BSA血清蛋白进行交联,,,,,构建了BSA血清蛋白交联的二聚体结构。。。。。。通过对二聚体结构进行质谱分析,,,,,鉴定到的交联肽段与现有文件数据(Nature Communications, 13(1), 1468.)相吻合,,,,,从而验证了尝试的正确性和靠得住性。。。。。。
数据展示:
※通过可见光交联新技术解析蛋白交联位点,,,,,成立 VL-XL-pulldown 步骤,,,,,提升互作蛋白鉴定数量,,,,,在活细胞水平深度解析蛋白质动态互作组及表源化学分子诱导形成新的蛋白质相互作用(Neo-PPIs)。。。。。。本文共统一作者胡昊博士现为3377体育官网生物研发总监。。。。。。 Visible-Light-Controlled Lysine-Selective Crosslinking Decodes Protein Complexes and Dynamic Interactomes in Live Cells。。。。。。Angew. Chem. Int. Ed., 2025, doi:10.1002/anie.202507254.(IF:16.9)
※化学交联职能可绘造 ClpXP(ATP 依赖性丝氨酸蛋白酶)的蛋白互作组图谱并解析原位相互作用网络,,,,,质谱分析批注与不含交联剂的免疫共沉淀相比,,,,,其覆盖率提高了 3 倍。。。。。。 Chemical Cross-Linking Enables Drafting ClpXP Proximity Maps and Taking Snapshots of In Situ Interaction Networks.Cell Chem Biol. 2019;26(1):48-59.e7.(IF: 8.2)